兔載脂蛋白E（apo-E）酶聯(lián)免疫試劑盒

簡要描述：產(chǎn)品名稱：兔載脂蛋白E（apo-E）酶聯(lián)免疫試劑盒
成份：酶標(biāo)板、試劑、標(biāo)準(zhǔn)品等
規(guī)格：48T/96T
保存條件：2~8℃，溫度6攝氏度，有效期6個月
服務(wù)：免費代測
精準(zhǔn)度：高

產(chǎn)品型號： LB-40628273

所屬分類：其它ELISA試劑盒

更新時間：2022-05-04

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

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詳情介紹

兔載脂蛋白E（apo-E）酶聯(lián)免疫試劑盒

規(guī)格：96T/48T

產(chǎn)品用途：科研實驗

公司服務(wù)：ELISA試劑盒免費代測

兔載脂蛋白E（apo-E）酶聯(lián)免疫試劑盒

1.標(biāo)記方法良好的酶結(jié)合物取決于兩個條件：即高效價的抗體和高活性的酶?？贵w的活性和純度對制備標(biāo)記抗體至關(guān)重要，因為特異性免疫反應(yīng)隨抗體活性和純度的增加而增強。在酶標(biāo)記過程中，抗體的活性有所降低，故需要純度高、效價高及抗原親和力強的抗體球蛋白，最好使用親和層析提純的抗體，可提高敏感性，而且可稀釋使用，減少非特異性吸附。

酶與抗體交聯(lián)，常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標(biāo)記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行，標(biāo)記效果好，特別適用于實驗室的小批量制備。其標(biāo)記程序為：將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中，加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉（NaIO4）水溶液0.5ml，混勻置4℃冰箱30分鐘，取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml，室溫放置30分鐘后加入含5(g純化抗體的水溶液1ml，混勻并裝透析袋，以0.05mol/L、pH9.5的碳酸鹽緩沖液于4℃冰箱中慢慢攪拌透析6小時（或過夜）使之結(jié)合，然后吸出， 5(g/ml)0.2ml，置4℃冰箱2小時，將上述結(jié)合物混合液加入等體積飽和硫酸銨溶液，置4℃冰箱30分鐘后離心，將所得沉淀物溶于少許0.02mol/L、pH7.4PBS中，并對之透析過夜（4℃），次日離心除去不溶物，即得到酶標(biāo)抗體，用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml，進行測定后，冷凍干燥或低溫保存。

按下列公式計算：

酶量（mg/ml）=OD403×0.42

IgG量（mg/ml）=（OD280－OD403×0.4）×0.94×0.62

對于過碘酸鈉氧化法制備的標(biāo)記抗體量，按下列公式計算：

IgG量（mg/ml）=（OD280－OD403×0.34）×0.62

已知酶量和IgG量后，即可計算出標(biāo)記抗體的摩爾（mol）比值。

HRP/IgG摩爾比值=HRP（mg/ml）/IgG（mg/ml）×4

結(jié)合物中酶總量=HRP（mg/ml）×結(jié)合物溶液量

結(jié)合物產(chǎn)率=結(jié)合物中酶總量/標(biāo)記時加入的酶量×100%

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