規(guī)格：96T/48T

產(chǎn)品用途：僅供科研檢測(cè)，不得用于臨床

公司服務(wù)：ELISA試劑盒 免費(fèi)代測(cè)檢測(cè)

檢測(cè)樣本種類：血清，血漿，尿液，組織勻漿，細(xì)胞上清液，灌洗液，糞便等樣本

力波生物供應(yīng)種屬有：大鼠，小鼠，豚鼠，兔，犬，猴，豬牛羊，雞鴨鵝，植物，魚，昆蟲ELISA試劑盒等

兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶（eNOS）檢測(cè)試劑盒

本試劑僅供研究使用  標(biāo)本：血清或血漿及相關(guān)液體

兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒試驗(yàn)原理：

兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒是采用雙抗夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）方法。

兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒內(nèi)容及其配制

兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒自備材料

1． 蒸餾水。

2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3． 振蕩器及磁力攪拌器等。

兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒安全性

1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。

2． 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)

1． 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀釋過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

2． 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

3． 不用的其它試劑，應(yīng)包裝好或蓋好，不同批號(hào)的試劑不要混用，保質(zhì)前使用。

4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液，使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6． 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

7． 底物A易揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子，底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒，實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

8． 加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

9． 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法

1、 血  清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2、 血  漿----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)，1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細(xì)胞上清液--1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 組織勻漿--－將組織加入適量生理鹽水搗碎，1000×g離心10分鐘，取上清液。

5、 保  存----如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-80 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血，如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾，不要在37℃或更高的溫度加熱解凍，應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒試劑的準(zhǔn)備

1． 標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存，稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻，稀釋比例按說明書要求進(jìn)行。

2． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒操作步驟

1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

2． 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔，每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。

3． 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體，蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。

4． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次，如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

5． 每孔加入50ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次，如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

8． 取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。

9． 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。